Gru en Lucy en hun meisjes – Margo, Edith en Agnes – verwelkomen een nieuw lid van de Gru-familie, Gru Jr., die van plan is zijn vader te kwellen. Gru wordt geconfronteerd met een nieuwe vijand: Maxime Le Mal en zijn femme fatale vriendin Valentina, en de familie wordt gedwongen op de vlucht te gaan.